川芎嗪对巨噬源性泡沫细胞形成的抑制作用研究

-- 川芎嗪对巨噬源性泡沫细胞形成的抑制作用研究

文章来源:期刊 作者:于 妍 发布时间:2018年05月24日 点击数:703 字号:
目前,心脑血管疾病的发病率、复发率、致残率及病死率均很高,而动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)是这类疾病的共同病理基础。在AS斑块中,巨噬细胞由于摄取了过多的胆固醇而形成泡沫细胞,这类巨噬源性泡沫细胞是AS斑块形成和发展过程中的主要细胞类型,也是AS早期特征[1]。中医理论认为AS 的发生与痰浊、血瘀密切相关[2]。川芎嗪是活血化瘀中药川芎中提取的生物碱,是川芎主要有效成分之一,在抗
AS 方面具有显著作用[3]。本试验以人急性单核细胞白血病细胞株1(THP-1)为研究对象,观察巨噬源性泡沫细胞形成中细胞内胆固醇含量及酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶1(ACAT-1)表达的变化情况,并在此基础上给予川芎嗪干预,初步探讨川芎嗪在巨噬源性泡沫细胞形成过程中的调节作用及其可能的机制。
1 材料
1.1 仪器
SVE -4A1 型超净工作台(新加坡 Esco 公司);HERAcell150i型CO2细胞培养箱(美国Thermo公司);Biofuge 28RS型低温高速离心机(德国Heraeus公司);4000B型倒置相差显微镜及成像系统(德国Leica公司);Clinicbio128C型酶标仪(澳大利亚Asys Hitech公司);GeneAmp 2400型聚合酶链反应PCR)系统(美国Perkin Elme公司);Mx3000P/3005P型实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)仪(美国gilent公司);DY-CZ-25E型电泳仪、转膜仪、电泳槽(北京六一仪器厂)。
1.2 药品与试剂血管紧张素Ⅱ(AngⅡ,美国Sigma公司,批号:A9525);佛波酯(PMA,美国Sigma 公司,批号:P1585);氧化低密度脂蛋
摘 要 目的:研究川芎嗪对巨噬源性泡沫细胞形成的抑制作用及其可能的作用机制。方法:将人急性单核细胞白血病细胞株1(THP-1)与160 nmol/L佛波酯(PMA)孵育24 h,使之分化为巨噬细胞;再将巨噬细胞与80 mg/L氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)培养液孵育24 h,使之向泡沫细胞转化;再将上述细胞随机分为空白对照(ox-LDL)组、模型(AngⅡ)组、阳性对照(缬沙坦)组和川芎嗪低、中、高浓度(质量浓度分别为0.025、0.05、0.1 g/L)组,各组细胞分别与80 mg/Lox-LDL培养液孵育48 h后,采用油红O 染色观察巨噬源性泡沫细胞转化率,酶化学法测定细胞内胆固醇含量,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法和Western blot法分别检测酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶1(ACAT-1)mRNA、蛋白的表达。结果:与空白对照组比较,模型组巨噬源性泡沫细胞转化率升高,细胞内胆固醇含量增加,ACAT-1 mRNA、蛋白的表达均增强,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05);与模型组比较,阳性对照组与川芎嗪低、中、高浓度组泡沫细胞转化率降低,细胞内胆固醇含量减少,ACAT-1 mRNA、蛋白的表达减弱,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论:川芎嗪可抑制巨噬细胞分化为泡沫细胞。其可能的作用机制为通过抑制ACAT-1的表达、降低细胞内胆固醇含量,从而减少巨噬源性泡沫细胞形成。
关键词 川芎嗪;巨噬源性泡沫细胞;血管紧张素Ⅱ;酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶1
 
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